銀顆粒的大小和分辨力。雖然在膠片銀顆粒的大小與底片的分辨力之間存在著一些關(guān)系,但是這兩者直接相關(guān)的看法顯然是一種誤解。應(yīng)該記住:在顯微鏡()照相中底片的分辨力并不主要取決于膠片的銀順粒大小,奧林巴斯顯微鏡的高分辨力主要依靠有效地使用高質(zhì)量的顯微鏡才能得到,顯微照片的分辨力是不能單純靠照相來提高的。也就是說,一種具有較粗銀顆粒的膠片還是可以得到比較高的分辨力,當(dāng)然一種具有較細(xì)銀穎粒的膠片常常可以得到更好的像的復(fù)制。顯微鏡底片上的顆粒本身并不*與鹵化銀微粒的實(shí)際大小(變化在零點(diǎn)幾個(gè)5m和幾個(gè)協(xié)。范圍之內(nèi))有關(guān),而顯微鏡主要地還與鹵化銀顆粒在乳膠層上的分布、顯影劑的類型和一些其他因素有關(guān)。尼康顯微鏡一般具有較細(xì)銀顆粒的膠片感光速度是比較低的。底片上的顆粒大小并不是膠片的固有特性,顯微鏡曝光(過度曝光的程度)和顯影過程(顯感劑種類和顯影時(shí)間)都會(huì)影響底片上zui終的顆粒大小。
膠片的色調(diào)(或稱反差)。當(dāng)一種照相乳膠片用它所敏感的波長(zhǎng)光照射時(shí),在曝光量(光流量x曝光時(shí)間)和被顯影后底片上銀穎拉的數(shù)量之間存在著一定的關(guān)系。單位面積底片上銀顆粒的數(shù)量稱為密度,顯微鏡它可以用密度計(jì)來測(cè)量,當(dāng)?shù)灼系拿芏菵對(duì)應(yīng)于曝光量的對(duì)數(shù)被繪成曲線時(shí),就可以看出兩者之間并不是一個(gè)簡(jiǎn)單的線性關(guān)系。只有在曲線的p-q部分存在著線性關(guān)系,
數(shù)碼顯微鏡當(dāng)達(dá)到高峰值后,曝光量的進(jìn)一步增加反而引起密度的降低。線性的P-9部分具有一定的斜度,這個(gè)斜度就是膠片的色調(diào)或者稱為膠片的反差(注意不要與像的反差混淆),它的度量單位是伽馬,但也可以用角a表示。當(dāng)a二450時(shí),伽馬是1,當(dāng)a>450,曝光量上的小的變化就會(huì)引起底片密度的大幅度變化,這時(shí)膠片的反差就大,這種膠片被說成是硬的,當(dāng)a<45曝光量上的大的變化只能引起底片密度的較小顯微鏡變化,這時(shí)膠片的反差小,這種膠片可以說是軟的??梢钥闯銮€的P-9部分在橫坐標(biāo)上的投影將指示出膠片曝光的合適范圍,并且這個(gè)因素是同膠片的反差相關(guān)的。
由于在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)中所遇到的大多數(shù)顯微鏡標(biāo)本成分之間的吸收差異是不太大的,因此在顯微照相中應(yīng)采用反差較大的膠片來補(bǔ)償顯微鏡像較小的反差。另外還可以通過延長(zhǎng)顯微鏡顯影時(shí)間或增高顯影液濃度來增大顯微鏡底片的反差。
膠片的感光速度。
數(shù)碼顯微鏡的膠片的感光速度在歐洲是用DIN數(shù)表示,在美國(guó)及其他許多地區(qū)使用ASA系統(tǒng)。DIN值每增加3個(gè)數(shù)字,感光速度增大1倍,而ASA系統(tǒng)是以幾何級(jí)數(shù)加倍的,現(xiàn)將兩種系統(tǒng)的對(duì)應(yīng)關(guān)系(每級(jí)感光速度增加十倍)列在下面:
在許多情況下對(duì)于顯微照相中不移動(dòng)的標(biāo)本來說膠片的感光速度不是很重要的,除了很快褪色的標(biāo)本以外,顯微鏡不需要用感光速度很快的膠片。一般可以說膠片的顆粒愈細(xì),反差愈大,感光速度也就愈慢,在顯微照相中大多采用具有較細(xì)顆粒、顯微鏡適當(dāng)高分辨力和中等反差的膠片。